健脾补肾、清肠化湿方对骨髓间充质干细胞增殖迁移的影响

摘要

目的观察健脾补肾、清肠化湿方对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖迁移的影响。方法贴壁筛选法体外分离培养BMSCs,制备细胞悬液,空白对照组不予任何药物干预,健脾补肾、清肠化湿方低、中、高剂量组(简称复方低、中、高剂量组)分别加入含有0.39、0.78、1.56μg/mL复方共同孵育。采用CCK-8法检测BMSCs增殖能力;采用Transwell法检测BMSCs迁移趋化能力。另设复方各剂量组联合细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)激酶抑制剂U0126作为对照,采用Western blot法检测ERK和环磷腺苷效应元件结合蛋白(CAMP responsive element-binding protein,CREB)蛋白磷酸化水平。结果与空白对照组比较,复方低、中、高剂量组均能促进BMSCs增殖和BMSCs迁移数目增多(P<0.05),且复方中、高剂量组促BMSCs增殖作用优于复方低剂量组(P<0.05)。与空白对照组比较,复方各剂量组ERK和CREB蛋白磷酸化水平升高(P<0.05),且能被U0126抑制(P<0.01);与复方低剂量组比较,复方中、高剂量组ERK磷酸化水平升高(P<0.05)。结论健脾补肾、清肠化湿方能促进BMSCs的增殖迁移,其机制可能与ERK/CREB信号通路有关。