补肾健脾方促进尾部悬吊大鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化的研究

摘要

目的观察补肾健脾方对尾部悬吊模拟失重大鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化能力的影响。方法大鼠随机分为正常、悬吊和补肾健脾共3组。后2组大鼠头低位-30度尾部悬吊连续21 d,补肾健脾组大鼠从实验第1天开始给予补肾健脾方灌胃,其余各组大鼠灌服等容积的生理盐水。实验第22 d处杀各组大鼠,全骨髓贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,观察细胞形态,取第3代细胞进行成软骨分化诱导实验,甲苯胺蓝染色法检测蛋白多糖,免疫荧光法检测Ⅱ型胶原表达情况。结果体外培养骨髓间充质干细胞传代至P3代,可见单一长梭形的成纤维细胞样细胞,呈漩涡状、辐射状规则排列。大鼠骨髓间充质干细胞经成软骨诱导后,甲苯胺蓝染色显示正常组细胞核和细胞质染成蓝色,轮廓清晰的细胞多;悬吊组细胞核染成蓝色,细胞质多数未着色,细胞轮廓不清;补肾健脾组细胞的细胞核和细胞质染成蓝色,轮廓清晰的细胞数目较悬吊组增多。免疫荧光染色显示正常组阳性细胞较多,荧光较强;悬吊组阳性细胞少见,荧光强度减弱;补肾健脾组阳性细胞较悬吊组增加,荧光强度增强。结论补肾健脾方具有促进尾部悬吊模拟失重大鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化的作用。