一种快速测定微生物发酵体系硫酸化多糖的方法研究

摘要

目的:建立适合微生物发酵体系硫酸化多糖的测定方法。方法:以代表性的硫酸化多糖——硫酸软骨素(CS)为对象,以二甲基亚甲基蓝(DMMB)法为基础,考察了测定波长、反应时间、体系pH值、培养基组分、多糖及蛋白等对该方法的影响。用氯化钡-明胶法测定硫酸根含量,以对DMMB法进行验证。结果:DMMB法最适测定波长为525 nm,反应时间为0~5 min,体系的pH值为3.0。培养基组分及蛋白质对结果影响不显著(P>0.05)。DMMB法能测定硫酸化的糖胺聚糖肝素和硫酸软骨素,而对非硫酸化糖胺聚糖透明质酸不响应。DMMB法测定硫酸化多糖和氯化钡-明胶法测定硫酸根相关性较好(R2>0.99),且DMMB法操作简单。结论:DMMB法可用于测定微生物发酵体系硫酸化多糖,且简便快速。