人角质细胞紫外线损伤模型筛选抗氧化剂的研究

摘要

目的探讨利用人角质细胞系建立紫外线损伤模型,研究抗氧化剂对细胞的影响,以建立快速筛检方法。方法体外培养HaCaT细胞,紫外线照射诱发氧化损伤模型,UVA及UVB照射强度分别为5和0.6 J/cm2。测试组分别更换含POCI和LBPC抗氧化剂的培养液,剂量为无细胞毒性的最大浓度,同时设空白对照组、模型组和抗坏血酸阳性对照组。应用MTT(噻唑蓝)比色法、二氯荧光素(DCFH-DA)标记法、PI荧光素标记法和Annexinv/PI双染法,比较细胞活性、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和细胞周期及细胞凋亡等指标的变化。结果紫外线可造成HaCaT细胞明显氧化损伤。测试组SOD水平与照射组相比明显升高(P<0.001);测试组ROS荧光强度、细胞凋亡率及S期细胞比例均显著降低(P<0.001)。POCI抗氧化强度高于LBPC,两者均弱于VC。结论应用紫外线损伤HaCaT细胞模型检测抗氧化剂的保护作用,可为抗氧化特性及强度的预测提供依据。