癌/睾丸抗原TSP50在脂多糖刺激下引起宫颈上皮内瘤变的机制研究

摘要

目的探讨癌/睾丸抗原TSP50在宫颈上皮内瘤变发展过程中可能介导的作用,为完善其病理机制提供数据支撑。方法体外培养End1/E6E7细胞,设立对照组(不接受刺激的End/E6E7)、空质粒组(转染空质粒)、TSP50shRNA干扰组(转染包涵TSP50的慢病毒)。脂多糖(LPS)干预8 h后,使用免疫蛋白印记(WB)实验检测TSP50的表达情况以及由其引起的变相关蛋白IKB-α、TLR4、P65、MMP-2的表达水平;免疫荧光实验检测增殖相关标记物Ki67及上皮细胞间质化标记物N-cadherin的变化;使用real-time PCR检测雌激素代谢相关酶COMT、CYP17的表达变化。连续培养14 d,采用克隆集落形成实验检测细胞增殖活性的变化。结果LPS干预8 h后,相比于对照组,TSP50shRNA干扰组TSP50、TLR4、P65、MMP-2蛋白表达降低,IKB-α蛋白表达升高;COMT、CYP17A的m RNA表达升高;Ki67表达降低,N-cadherine表达升高;各指标组间差异有统计学意义(P<0.05)。连续培养14 d后,TSP50shRNA干扰组集落克隆数目明显减少(P<0.05)。结论TSP50在宫颈上皮内瘤变的发生过程中可能起到促进作用,其机制可能与促进细胞增殖和调节雌激素代谢有关。