补肾活血方通过调节BMP-2/Runx2/Osterix信号通路抑制慢性肾衰竭大鼠血管钙化的实验研究

摘要

目的观察补肾活血方对慢性肾衰竭大鼠血管钙化（vascular calcification,VC）的BMP-2/Runx2/Osterix信号通路作用,探讨其可能的作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组与中药组,每组10只。模型组与中药组大鼠实验第1~4周给予250 mg/kg腺嘌呤混悬液灌胃及含1.8%高磷饲料每日1次喂养,第5~8周腺嘌呤改为隔日灌胃。中药组同时按55 g/（kg·d）剂量给予补肾活血方灌胃治疗,每日1次。正常组灌胃等量生理盐水。共给药8周。HE染色观察肾组织变化,茜素红染色观察主动脉钙化结节情况,腹主动脉取血检测血清钙（Ca）、磷（P）、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、全段甲状旁腺激素（i PTH）,Western blot法检测骨形态发生蛋白-2（bone morphogenetic protein,BMP-2）及其下游调节因子即核心结合因子（Runt related transcription factor,Runx2）、成骨细胞特异性转录因子（Osterix）蛋白的表达。结果 HE染色观察提示：与正常组比较,模型组肾小球结构紊乱,肾小管扩张积水,腔内有炎性细胞的浸润,肾小管内棕褐色结晶沉积,肾脏间质纤维化,肾脏血管明显减少;与模型组比较,中药组正常肾小球数目增多,肾小管扩张程度降低,炎性细胞数量下降,腺嘌呤结晶减少。茜素红染色观察提示：与正常组比较,模型组主动脉出现钙化结节,广泛红色颗粒物沉着;与模型组比较,中药组钙化结节减少。与正常组比较,模型组大鼠血P、SCr、BUN、i PTH水平均明显升高,血Ca水平明显下降,BMP-2、Runx2、Osterix蛋白表达亦增高（P〈0.05,P〈0.01）;与模型组比较,中药组血清P、SCr、BUN、i PTH水平均明显下降,血Ca水平明显升高,BMP-2、Runx2、Osterix蛋白表达均降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论补肾活血方能够改善慢性肾衰竭大鼠肾功能和钙磷代谢,改善肾脏组织学结果,下调BMP-2/Runx2/Osterix信号通路在慢性肾衰竭VC中的表达,这可能是其抑制慢性肾衰竭VC的作用机制之一。