邻苯二甲酸二乙基己酯及代谢产物MEHP对幼鼠睾丸组织TGF-β1表达和端粒酶活性的影响

摘要

目的:观察邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)及代谢产物邻苯二酸-单-2-乙基己酯(MEHP)对幼鼠睾丸组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达和端粒酶活性的影响,探讨DEHP和MEHP损害生精功能可能的机制。方法:生后2周龄的Wistar雄性幼鼠96只,随机分8组,每组12只。随机选择1组行生理盐水[0.9%NS0.2 ml/(kg.d),喂养3周]灌胃,作为正常对照组(NC组);再选1组行环磷酰胺[CTX 100 mg/(kg.d),喂养1周]灌胃,作为阳性对照组(PC组);余各组分别用DEHP、MEHP按低剂量[100 mg/(kg.d),喂养3周]、中剂量[200 mg/(kg.d),喂养2周]、高剂量[300 mg/(kg.d),喂养1周]灌胃制作动物模型。观察不同时期、不同剂量下睾丸组织精子形态变化,光镜下计数精子头部及畸形率;应用免疫组化SABC法及RT-PCR法检查睾丸组织TGF-β1的表达,并测定面密度;ELISA法检查睾丸组织中端粒酶活性。结果:①睾丸组织内精子形态变化:用药组精子数量减少,出现精子断头、无钩、双尾等畸形精子;在光镜下精子计数,与NC组比较,用药各组精子头部显著减少(P0.05)。②睾丸组织TGF-β1的表达变化:NC组低表达,DEHP及代谢产物MEHP染毒各组生精细胞内表达增多,PC组大量表达,阳性细胞呈黄褐色,主要分布于胞膜及胞质。NC组面密度为0.156 0±0.003 5、TGF-β1mRNA为1.51±0.20,PC组面密度为0.534 0±0.003 1、TGF-β1 mRNA为8.43±1.75;用药的DEHP组面密度均值为0.289 0±0.003 6、TGF-β1 mRNA为3.83±1.57,MEHP组面密度均值为0.284 0±0.003 1、TGF-β1 mRNA为3.51±1.41,用药各组与NC组、PC组比较差异有统计学意义(P0.05);③睾丸组织中端粒酶活性:与NC组比较,用药各组睾丸组织中端粒酶活性下降(P0.05)。结论:DEHP及代谢产物MEHP对幼鼠生精功能有明显损害,其损害机制可能与DEHP及代谢产物MEHP诱导睾丸组织TGF-β1的表达水平升高、端粒酶活性降低有关。