重组大肠杆菌生产脂肪氧合酶的发酵优化

摘要

以本研究室保存的脂肪氧合酶生产菌株重组大肠杆菌Rosetta(DE3)/pre-LOX为研究对象,在摇瓶水平上对培养基、诱导温度、诱导剂浓度、外源添加物进行优化;在3L发酵罐水平上对初始诱导菌体浓度(OD600)进行优化。摇瓶发酵条件下,诱导温度为20℃,当菌体OD600达到0.6,添加1mmol/L诱导剂及0.5%吐温-20,胞外酶活达到8.4U/mL;在3L发酵罐上,诱导温度为20℃,当菌体OD600达到8.0,添加1mmol/L诱导剂及0.5%十二烷基磺酸钠,胞外酶活为8.3U/mL,这是国内外发酵生产脂肪氧合酶的最高水平,对生产实践具有一定的指导意义。