洋葱orf393基因线粒体定位表达载体构建及功能初探

摘要

通过转基因拟南芥表型分析对洋葱线粒体差异表达基因orf393的功能进行了初步研究。通过In-Fusion Cloning的方法,将基因orf393与编码线粒体定位的靶向肽序列Rf1b5'融合,构建了orf393基因的线粒体定位表达载体pROK2-Rf1b5'-orf393,通过花序浸染法成功转化至野生型拟南芥,获得了雄性育性降低的拟南芥转基因植株,转基因植株的雄蕊花丝变短,柱头表面光滑几乎没有花粉附着,花药颜色暗淡无法正常开裂,种荚短小皱缩、结实率低。亚历山大染色实验结果显示,转基因植株的花药中花粉量少,仅含有极少量的活性花粉。初步证明线粒体基因orf393与细胞质雄性不育有一定关系,为明确orf393参与洋葱细胞质雄性不育的分子机制提供了参考。