修正RNA的错误剪接提高转基因表达水平

摘要

建立了WAP基因调控序列指导的人G-CSF乳腺表达的转基因小鼠,在检测出转基因低表达的基础上,采用RT-PCR从转基因小鼠乳腺RNA中获得人G-CSF基因,序列分析表明基因缺失第4外显子。与人G-CSF基因组基因比较,缺失部分含有内含子剪接的供体和受体位点,推断G-CSF的第3和第4内含子亦缺失。重新构建了转基因注射构件,其中删除了G-CSF第3和第4内含子,用其所建立的转基因小鼠,其乳腺表达的G-CSF较修正前基因构件提高5.4倍。结果表明,RNA的异常剪接可能是转基因低表达的一个重要因素。