肺炎球菌调理吞噬杀菌实验方法建立与应用

摘要

目的建立肺炎球菌多重调理吞噬杀菌实验,并在此基础上评价肺炎球菌疫苗免疫后效果。方法参照美国阿拉巴马大学多重调理吞噬杀菌实验方法(MOPA),构建7价肺炎球菌结合疫苗血清型的肺炎球菌的工作菌种库和HL-60细胞库,测定工作菌种库抗生素耐药性及稀释度,HL-60分化5~6 d后的表面标志表达量及活性,同时测定标准血清007SP和参考血清09CS的调理杀菌值;在方法建立的基础上,对疫苗免前免后获得的6对血清样本的功能性抗体进行检测。结果工作菌种稀释度均> 300倍;HL-60分化5~6 d的表面标志表达量CD11b> 80%,CD35> 70%,CD71 70%,凋亡细胞比例<21%;补体的非特异杀伤均<30%。标准血清007SP和参考血清09CS的调理杀菌值稳定在质控范围内;疫苗接种后,血清样本的杀菌曲线为S型曲线,并且调理杀菌值保持在较高水平。结论成功建立MOPA实验方法,为肺炎球菌疫苗免疫后的效果评价提供了方法依据。