镉对人肝癌细胞增殖及凋亡影响

摘要

目的研究镉对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721分别以0、40、80、160μmol/L的CdCl2处理0～48 h,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞相对存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡百分率,分光光度法检测半胱天冬酶Caspase-3酶活性的变化,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(western blot)法测Caspase-3 mRNA和蛋白表达的变化。结果随着镉处理浓度的增加,氯化镉对细胞活力的抑制作用明显增强,40、80、160μmol/L氯化镉处理SMMC-7721细胞,其抑制率分别为33.94%、48.04%和68.54%,均明显高于0μmol/L氯化镉处理组,差异均有统计学意义(P<0.01);40、80、160μmol/L镉处理组细胞的凋亡百分率分别为(25.77±4.66)%、(34.97±9.25)%和(55.14±5.67)%,与0μmol/L镉处理组比较明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);镉处理SMMC-7721细胞24和48 h,Caspase-3相对酶活性均随着镉浓度的增加而明显增强;40μmol/L镉处理SMMC-7721细胞,12、24和48 h可明显上调细胞中Caspase-3基因及蛋白的表达,Caspase-3基因mRNA表达水平分别为对照组的4.1、3.7和3.9倍,Caspase-3蛋白表达分别为对照组的5.8、6.0和7.2倍。结论镉能明显抑制人肝癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,Caspase-3基因在镉诱导SMMC-7721细胞凋亡过程中起着重要的作用。