葡萄糖剥夺增强NQO1底物β-拉帕醌的抗肿瘤作用研究

摘要

目的考察葡萄糖剥夺对β-拉帕醌抗肿瘤作用的影响。方法采用2-NBDG葡萄糖摄取实验检测β-拉帕醌对细胞葡萄糖摄取能力的影响;为了考察葡萄糖剥夺后对β-拉帕醌抗肿瘤作用机制的影响,采用双香豆素(DIC)、NAD^+、caspase抑制剂(z-VAD-fmk)预温孵后检测β-拉帕醌对细胞活力的影响,同时采用Western blot法检测β-拉帕醌对SIRT1蛋白表达的影响。结果 β-拉帕醌可以浓度依赖性地促进细胞对葡萄糖的摄取;完全剥夺培养基中的葡萄糖后,β-拉帕醌的细胞毒作用明显增加,IC50由先前的10.89 μmol·L^-1降低至1.80 μmol·L^-1,约降低了6倍。DIC和NAD^+预温孵60 min,能显著逆转葡萄糖剥夺条件下β-拉帕醌的细胞毒作用;而caspase抑制剂预温孵60 min不能逆转β-拉帕醌的细胞毒性。葡萄糖剥夺后,2.5 μmol·L^-1 β-拉帕醌明显下调细胞内SIRT1蛋白。结论葡萄糖剥夺可以显著增强β-拉帕醌的抗肿瘤作用,且不改变其NQO1依赖的抗肿瘤作用机制。