小柴胡汤丸中黄芩苷含量及体外抗氧化活性测定

摘要

目的测定不同厂家小柴胡汤丸中黄芩苷含量并评价其抗氧化活性。方法采用HPLC法测定不同厂家小柴胡汤丸中黄芩苷的含量。色谱柱为inertsustain C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(体积比42.5∶57.1∶0.4),流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为276 nm,柱温为30℃,进样量为10μL;用铜离子还原法测定其还原能力,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(diphenoxydiphenylsulfone,DPPH)法、2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(2'-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate,ABTS)体系对其进行抗氧化活性的研究,并以抗坏血酸维生素C(ascorbic-acid-see also vitamin C,Vc)作比较。测定并计算其相对总还原百分率或清除率,以相对总还原率或清除率为纵坐标、样品液的质量浓度为横坐标做线性回归,从回归曲线的置信限中得到概率为0.50的估算半抑制浓度(IC50),与黄芩苷含量进行相关性分析。结果所建立的含量测定方法线性关系良好(r=0.9998),同时具有较好的重复性和稳定性,平均加样回收率为102.3%,不同厂家的小柴胡汤丸中黄芩苷含量为7.69~18.37 mg·g^(-1);小柴胡汤丸对铜离子还原能力、对DPPH和ABTS自由基清除能力的IC50分别为0.5775~0.6987、0.1379~0.3136、0.0514~0.1001 mg·L^(-1);在系列浓度内,小柴胡汤丸的抗氧化活性随着浓度的增加而增强,但弱于Vc。结论不同厂家生产的小柴胡汤丸黄芩苷含量差异较大;小柴胡汤丸具有抗氧化活性,与黄芩苷的含量呈显著性正相关。