TRPA1激动剂桂皮醛防止高糖介导的心肌细胞氧化应激损伤

摘要

目的探讨桂皮醛对高糖介导的心肌细胞氧化应激损伤的作用及机制。方法大鼠心肌细胞(H9C2)以高糖培养基(33 mmol/L D-葡萄糖)培养,以低糖培养基(5.5 mmol/L D-葡萄糖)作为对照。首先利用Western blot和免疫组织化学证实瞬时受体电位通道A1亚型(TRPA1)在H9C2心肌细胞中的表达;在此基础上分别利用线粒体超氧化物荧光探针(mito SOX)及TUNEL细胞凋亡试剂盒观察桂皮醛对高糖环境下H9C2细胞线粒体活性氧(ROS)水平以及细胞凋亡的影响,以Western blot法观察Nrf2和TRPA1的表达;利用荧光定量PCR观察TRPA1及Nrf2 mRNA水平。结果 TRPA1在H9C2细胞中有表达,桂皮醛可显著抑制高糖介导线粒体ROS生成(P<0.01),并可减少心肌细胞的凋亡(P<0.01),而上述作用可被TRPA1的阻断剂HC 030031所阻断。桂皮醛可上调TRPA1、Nrf2的蛋白及mRNA表达(P<0.01),而通过HC 030031抑制TRPA1可显著减弱桂皮醛的上述作用(P<0.01)。结论桂皮醛可防止高糖介导的心肌细胞氧化应激损伤,而该作用可能与其激活TRPA1,上调Nrf2有关。