Nrf2信号通路调控自噬对UVA诱导人真皮成纤维细胞凋亡的作用

摘要

目的探讨Nrf2信号通路介导的细胞自噬在UVA诱导人皮肤成纤维细胞凋亡过程中的作用。方法体外培养正常人皮肤成纤维细胞,分为对照组、UVA组、自噬诱导剂雷帕霉素(rapamycin,RAPA)组、自噬抑制3-甲基嘌呤(3-methyladenine,3-MA)组、核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385)组及干涉(siRNA)组;各实验组经8 J/cm^(2)的UVA照射;采用流式细胞术检测成纤维细胞凋亡;CCK-8检测细胞活性变化;Western blot检测细胞自噬及凋亡关键分子、p62及Nrf2蛋白表达水平。结果经8 J/cm^(2)的UVA照射后成纤维细胞凋亡比例增加、胞内自噬水平显著升高;自噬抑制剂3-MA处理后可显著促进UVA照射引起的成纤维细胞凋亡;而自噬促进剂RAPA处理细胞后,细胞凋亡率较UVA组相比显著降低(P<0.01);与对照组相比,UVA照射后胞核Nrf2表达显著增高;ML385阻断Nrf2入核及使用siRNA干涉Nrf2表达后,自噬关键蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ降低(P<0.01),p62表达显著减少(P<0.01),凋亡相关蛋白Cleaved Caspase3表达增加(P<0.01)。结论UVA照射可通过Nrf2及下游p62信号通路上调细胞自噬水平,抑制UVA诱导成纤维细胞凋亡。