大气细颗粒物PM_(2.5)介导氧化应激对人角质形成细胞HaCaT凋亡的影响

摘要

目的研究大气细颗粒物PM_(2.5)对人角质形成细胞HaCaT的损伤作用及凋亡的影响。方法收集郑州市区空气中的PM_(2.5),分离并提取其水溶性及非水溶性成分,以不同的终浓度处理HaCaT细胞。CCK-8检测细胞增殖率,确定PM_(2.5)最佳作用浓度和时间。透射电子显微镜(TEM)检测细胞线粒体结构及细胞整体形态的变化。抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)作用后,检测各组细胞内活性氧(ROS)水平、白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌水平及细胞凋亡率。结果在实验浓度和时间范围内,细胞增殖率随PM_(2.5)浓度和时间的增加而降低,具有显著的剂量和时间效应关系。TEM实验结果表明,PM_(2.5)作用后,细胞线粒体等超微结构表现出明显的损伤效应。与对照组相比,PM_(2.5)作用后细胞内ROS水平、IL-1β、TNF-α及细胞凋亡率均显著增加(P<0.05);与PM_(2.5)组相比,加入NAC后,ROS水平、IL-1β、TNF-α及细胞凋亡率均显著降低(P<0.05)。结论 PM_(2.5)能够对HaCaT造成明显的细胞氧化损伤,诱导炎性因子分泌和细胞凋亡;而NAC可以在一定程度降低氧化损伤、炎性因子分泌和细胞凋亡。