miRNA-152在损伤足细胞中异常表达的研究

摘要

目的 以阿霉素(Adriamycin,ADR)诱导的足细胞损伤模型,来研究miRNA-152在损伤足细胞中的表达,为阐明miRNA-152异常表达导致肾足细胞损伤的机制研究奠定基础.方法 将0.00μg/mL,0.05μg/mL,0.10μg/mL,0.20μg/mL,0.40μg/mL,0.80μg/mL浓度的ADR加入已分化培养6 d的足细胞中,诱导培养24 h后,通过足细胞骨架免疫荧光染色和Synaptopodin表达检测,鉴定足细胞的损伤;然后采用Real-time PCR法检测miRNA-152和14-3-3β的表达,分析miRNA-152和14-3-3β的表达关系.结果 分化培养6 d的足细胞在加入ADR 24 h后,鬼笔环肽免疫荧光染色结果显示,ADR诱导培养的足细胞中肌动蛋白应力纤维减少,且细胞骨架排列失调;Real-time PCR检测结果表明,ADR诱导培养的足细胞中,Synaptopodin的表达下降.在损伤足细胞中,Real-time PCR法检测结果表明,miRNA-152的表达上调,14-3-3β的表达则下降.结论 在损伤足细胞中,miRNA-152表达上调,而14-3-3β的表达则下降,提示了miRNA-152可能直接下调了14-3-3β的表达,进而导致足细胞损伤.