OX40基因原核表达及优化

摘要

目的构建小鼠OX40胞外段基因的原核表达载体,进行诱导表达并优化表达条件。方法PCR扩增OX40胞外段基因并将其插入原核表达质粒pET32a（+）,重组pET32a-OX40经测序鉴定后转入表达菌株BL21（DE3）进行融合蛋白的小量诱导表达,并优化表达条件。结果出现新增蛋白条带,融合蛋白主要存在于包涵体中;Western Blotting分析表明该融合蛋白可与相应抗体发生特异性结合。结论构建了小鼠OX40基因的原核表达载体,获得OX40胞外段融合蛋白的最佳表达条件,为后续单抗制备等工作奠定了基础。