下调miRNA-217对UVB诱导人皮肤成纤维细胞氧化损伤及Sirt1/FOXO1通路的影响

摘要

目的探讨下调微RNA-217(miRNA-217)对中波紫外线(UVB)诱导的人皮肤成纤维细胞(HFF-1)氧化损伤及沉默信息转录调节因子1(Sirt1)/叉形头转录因子1(FOXO1)信号通路的影响。方法将未损伤和UVB损伤的HFF-1细胞分为正常组、对照组、miRNA-217阴性对照(NC)组和miNAR-217抑制剂组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miRNA-217表达情况;细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞生长情况;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)法检测细胞凋亡情况;2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCHF-DA)荧光探针法检测活性氧(ROS)表达;过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒检测该指标水平;Western blot检测Sirt1、FOXO1和乙酰化FOXO1(Ac-FOXO1)蛋白表达。结果与对照组和miRNA-217 NC组比较,miRNA-217抑制剂组HFF-1细胞miRNA-217、凋亡率及MDA、ROS、Ac-FOXO1蛋白表达和Ac-FOXO1/FOXO1比值明显降低(P0.05);与正常组比较,对照组上述各指标变化呈相反趋势。结论下调miRNA-217可能通过促进Sirt1/FOXO1信号通路,保护UVB诱导下HFF-1细胞免受氧化损伤。