表达UGT1A1重组腺相关病毒载体的构建

摘要

目的 获得表达胆红素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸酶(UGT1A1)基因;构建UGT1A1重组腺相关病毒载体,制备腺相关病毒.方法 设计、合成引物,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从 HepG2细胞总RNA中扩增UGT1A1基因,最终连接于pAAV-MCS,双酶切、PCR鉴定阳性重组质粒,并在HEK293T细胞表达,制备高滴度重组腺相关病毒.结果 成功扩增了人类UGT1A1基因,构建表达UGT1A1基因重组腺相关病毒载体,并成功表达于HEK293T细胞.结论 本实验构建的人类UGT1A1重组腺相关病毒将为因UGT1A1活性不足导致的高胆红素血症的基因治疗奠定基础.