人可溶性CD40L表达及其生物学活性初步分析

摘要

目的将已构建好的重组表达质粒pET28a+-sCD40L进行优化条件表达,并将其目的蛋白纯化,对目的蛋白进行初步的活性分析.方法利用已构建好的重组表达质粒pET28a+-sCD40L进行目的蛋白的表达,优化表达的条件,利用Western-blot鉴定目的蛋白,在最适条件下进行目的蛋白的表达,利用Ni2+-NTA柱纯化目的蛋白,MTT法检测重组蛋白对人外周血淋巴细胞增殖活性的影响.结果利用 Ni2+-NTA柱将目的蛋白进行了分离纯化,且纯化的重组蛋白具有刺激人外周血淋巴细胞的增殖.结论成功优化了重组表达质粒pET28a+-sCD40L的表达条件,生物学活性的初步分析显示Ni2+-NTA柱纯化的重组蛋白具有刺激人外周血淋巴细胞增殖活性.