FISH 技术检测乳腺癌 HER-2基因的应用体会

摘要

目的：探讨荧光原位杂交（FIS H ）技术检测乳腺癌 H ER-2基因制片的最佳效果。方法本实验室对FIS H技术操作进行改进，采用胃蛋白酶滴加消化法替代了国内现行的蛋白酶K浸泡消化法，孵育温度37℃，时间12～15 min。切片充分洗涤也是实验成功的关键步骤，洗涤的时间、温度和pH值严格掌握，用配制洗涤液2倡SSC/0．3％ NP-40 pH7．0代替了50％甲酰胺洗涤液，温度74℃，时间2～3 min。结果在荧光显微镜油镜放大100倍下观察，HER-2桔红色，CEP-17绿色，采用多个视野任意共选取40个细胞计数桔红色和绿色信号，得出桔红色信号/绿色信号（HER-2/CEP-17），如 HER-2/CEP-17＜1．8，HER-2无扩增；如HER-2/CEP-17＞2．2，HER-2扩增；如介入两者之间，重新选取40个细胞计数，红、绿、蓝信号明显。结论本实验室改进后FISH技术检测乳腺癌 HER-2基因实验操作更加稳定，该技术操作简单快速，杂交成功率最高，可提高诊断率。