雷公藤多苷通过Wnt/β-catenin缓解IL-1β诱导的软骨细胞损伤

摘要

目的 探究雷公藤多苷对IL-1β诱导的软骨细胞损伤的作用及其潜在的分子机制.方法 密度梯度分离法分离SD大鼠软骨细胞.软骨细胞随机分为对照组、模型组、雷公藤多苷组(10、50 μg/mL雷公藤多苷)、LiC1组(50 μg/mL雷公藤多苷+20 mmol/L LiC1),加入10 ng/mL IL-1β诱导软骨细胞24 h,各给药组加入相应药物继续处理24 h.CCK-8检测细胞存活率,试剂盒检测LDH释放量及GAG水平,流式细胞仪检测细胞凋亡,ELISA检测细胞培养上清液中COX-2、iNOS水平,RT-PCR检测MMP13、Acan、Sox-9 mRNA表达,Westem blot检测Wnt通路Wnt3a和β-catenin蛋白的表达.结果 雷公藤多苷单独作用对软骨细胞存活率及LDH释放无影响.与对照组比较,模型组细胞存活率降低,LDH释放量增加,细胞凋亡率增加,GAG水平及Acan、Sox-9 mRNA表达降低,COX-2、iNOS水平及MMP13 mRNA表达升高(P＜0.05);经雷公藤多苷(50 μg/mL)干预后,细胞存活率升高、LDH释放量降低,细胞凋亡率降低,GAG水平及Acan、Sox-9 mRNA表达升高,COX-2、iNOS水平及MMP13 mRNA表达降低(P＜0.05);而将Wnt通路激活剂作用之后,雷公藤多苷对IL-1β诱导的软骨细胞上述作用全部被反转.结论 雷公藤多苷通过抑制Wnt/β-catenin通路缓解IL-1β诱导的软骨细胞损伤.