丹参酮ⅡA通过靶向GLUT1减轻缺血性脑卒中模型中神经细胞损伤的机制研究

摘要

目的 通过小鼠缺血性脑卒中模型,研究丹参酮ⅡA对神经细胞损伤的影响及其作用机制.方法 将小鼠随机分为假手术组(NC)、丹参酮ⅡA治疗组(TT)、丹参酮ⅡA联合GLUT1过表达治疗组(TO)和丹参酮ⅡA联合GLUT1抑制治疗组(TI),蛋白印迹法检测GLUT1在未经丹参酮ⅡA处理各组中的表达水平;用Morris水迷宫实验评价不同实验组小鼠空间学习和记忆能力;使用葡萄糖摄取试剂盒和葡萄糖分析试剂盒测量不同实验组小鼠脑组织葡萄糖摄取能力和浓度;用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测各组中每个靶基因的表达;蛋白印迹法检测各组中靶蛋白的表达;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组中血清样本中神经元保护因子的浓度.结果 丹参酮ⅡA联合GLUT1过表达治疗组(TO)中小鼠逃避潜伏期明显缩短,穿过平台数增多,目标象限时间增加;TO组血糖相对浓度降低,血糖摄取能力增高;TO组靶基因环加氧酶(COX)-2、白细胞介素(IL)-1β、前列腺素E2(PGE2)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达明显降低;TO组靶蛋白顺乌头酸酶2(ACO2)、己糖激酶2和苹果酸脱氢酶2(MDH2)的表达水平增高,LDHA的表达水平降低;TO组PI3K/AKT/mTOR信号通路激活;TO组神经营养素-3、钙保护素、GFAP和一氧化氮的表达升高.结论 丹参酮ⅡA处理能促进脑功能恢复,并能提高血清中葡萄糖浓度,这些影响可能是通过增加葡萄糖摄取能力而介导的.PI3K/mTOR/HER3信号通路在这些效应的调控中起着重要作用.GLUT1的过度表达可能是缺血性脑卒中治疗的一个重要靶点.