海艾汤调节雄性激素和Wnt/β-连环蛋白信号通路缓解小鼠雄激素脱发

摘要

目的探究海艾汤对雄性激素源性脱发(androgentie alopecia,AGA)小鼠的促毛发生长作用及机制。方法应用随机数字表法将48只小鼠分为正常对照组、模型组、阳性药物组(章光101育发剂)、海艾汤组、雄激素受体(androgen receptor,AR)激动剂组、海艾汤+AR激动剂组,每组8只。除正常对照组外,余下小鼠于背部皮下注射稀释丙酸睾丸酮建立小鼠脱发模型。涂抹给药(0.2 ml章光101育发剂或海艾汤),AR激动剂组和海艾汤+AR激动剂组灌胃雄烯二酮(10 mg·kg^(-1)·d^(-1)),连续28 d。给药期间观察小鼠毛发生长,并测量、称取新生毛发的长度和质量。给药结束后,检测造模区域皮肤组织和血清中睾酮、二氢睾酮(dihydrotes-tosterone,DHT)、雌二醇含量;苏木精-伊红(HE)染色观察组织毛囊生长情况、行半定量评分;蛋白质印迹法检测组织肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、AR、Wnt3a、Wnt5a、β-连环蛋白(betacatenin,β-catenin)、Axis抑制蛋白2(axis inhibition protein 2,Axin2)、半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine protease-3,caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)蛋白表达。结果与模型组比较,海艾汤可加速AGA小鼠皮肤变色[(12.1±1.6)d与(14.2±1.5)d,F=72.172,P<0.01],缩短新生毛发生长时间[(13.6±1.9)d与(17.9±1.4)d,F=67.666,P<0.01]、增加毛发长度和质量[(9.3±1.8)cm与(6.6±0.9)cm,F=25.562;(44.6±5.9)mg与(12.7±1.3)mg,F=320.916,P均<0.01),降低皮肤组织睾酮、雌二醇、DHT含量[(1982±174)pg/ml与(3769±358)pg/ml,F=113.402;(76±8)pg/ml与(103±13)pg/ml,F=61.584;(258±23)pg/ml与(376±38)pg/ml,F=54.580,P均<0.01),降低血清睾酮、DHT含量[(545±64)pg/ml与(651±52)pg/ml,F=21.176;(484±49)pg/ml与(583±54)pg/ml,F=6.030,P均<0.01]、提高血清雌二醇含量[(205±20)pg/ml与(173±18)pg/ml,F=22.555,P=0.014],并降低皮肤组织AR、Axin2、Bax、Caspase-3的相对蛋白表达[(2.09±0.20)与(3.45±0.34),F=57.414,P<0.01,(1.17±0.12)与(2.17±0.21),F=37.791,P<0.01;(2.21±0.22)与(2.80±0.28),F=34.276,P<0.01;(1.23±0.11)与(1.54±0.15),F=17.146,P=0.015],促进HGF、Wnt3a、Wnt5a、β-catenin、Bcl-2蛋白表达[(0.85±0.08)与(0.35±0.04),F=61.459;(1.07±0.11)与(0.59±0.06),F=38.011;(0.98±0.10)与(0.62±0.07),F=54.213;(0.85±0.09)与(0.58±0.06),F=40.080;(1.14±0.12)与(0.54±0.50),F=66.429,P均<0.01]。海艾汤对AR受体激动剂组小鼠也具有相同效果。结论海艾汤可能通过抑制AR表达调节激素水平,并通过促进Wnt/β-catenin信号通路来抑制凋亡,共同促进AGA小鼠毛囊和毛发的生长。