C型产气荚膜梭菌产α毒素能力分析及免疫原性试验研究

摘要

利用16S rRNA分子鉴定技术对病死羊体内分离的19株野毒株产气荚膜梭菌进行了分子生物学鉴定,从中筛选出产毒素稳定的一株C型产气荚膜梭菌(海C1株),并通过优化培养基配方及培养方式提高其产毒素能力,最终利用该菌株研制了羊猝疽灭活疫苗,完成了疫苗对家兔及羊的效力试验.结果显示,该菌株与现用羊瘁狙疫苗生产株分子系统发育树亲缘关系较近;该菌株(海C1株)在含1.0％ 葡萄糖,pH 8.4～8.6的VF培养基中36°C3～6h产毒最高可达7000 MLD/mL;利用该菌株研制的灭活菌苗对家兔的免疫保护力是1～1.5 MLD/mL(家兔静注),对绵羊的免疫保护力是4～16 MLD/mL(绵羊静注).免疫羊血清抗体效价达8～12 MLD/mL(小鼠静注).该菌株具有较强的产毒稳定性和较好的免疫原性,可作为羊猝疽疫苗生产备选菌株.