大鼠尿白蛋白的ELISA检测方法建立及应用

摘要

目的：建立竞争性ELISA方法，测定大鼠尿白蛋白含量。方法：将大鼠血清白蛋白标准品（RSA）包被于酶标板中，充分清洗、封闭后，加入标准RSA和辣根过氧化物酶标记的绵羊抗大鼠多克隆抗体，孵育后，充分清洗，以TMB显色，450nm测定吸光度（OD）。以RSA浓度对数值对OD值作线性回归，评价方法的特异性和重复性。应用此方法检测链脲酶素致糖尿病肾病（STZ-DN）大鼠的尿白蛋白，评价药物对糖尿病肾病的预防作用。结果：以每孔0．1μg RSA包被、1：10000稀释抗体，可获得较好的回归曲线，RSA检测范围在0．1-100μg／ml。STZ-DN大鼠的24小时尿白蛋白检测结果显示，阳性药氯沙坦及受试药HP治疗组均可降低大鼠尿白蛋白。结论：本文建立的竞争性ELISA方法具有简便、快速、重复性好、特异性强的特点，适用于抗肾病药物的药理学研究。