细胞色素P450w-羟化酶抑制剂HET0016通过ERK1／2途径减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

摘要

目的：细胞色素P450w-羟化酶在心肌缺血再灌注（MI／R）损伤中的作用尚不十分清楚。本课题研究HET0016[N-hydroxy-N＇-（4-butyl-2 methylphenyl）formamidine]，一种新的特异性细胞色素P450w-羟化酶抑制剂对MI／R损伤的保护作用，并探讨与丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的关系。方法：采用大鼠MI／R模型，缺血30min，再灌注2h。将大鼠随机分为以下各组，每组6-8只：①假手术组；②模型对照组；③HET0016高低剂量给药组：在缺血前15min分别给0．1和1mg·kg-I HET0016静脉注射；⑤MAPK抑制剂组：在缺血前10min分别给予ERKl／2抑制剂PD98059（1 mg·kg-l，iv）、p38MAPK抑制剂SB203580（1mg·kg-1，iv）或JNK抑制剂SP600125（6mg·kg-1，ip）；⑥lmg·kg-1 HET0016＋MAPK抑制剂（PD98059，SB203580或SP600125）组。再灌结束后计算心肌梗死面积，测定LDH、CK和TnT水平。Westernblot检测心肌组织磷酸化ERKl／2、p38 MAPK及JNK蛋白表达水平。结果：①模型组较正常组大鼠血清LDH、CK和TnT分别升高6．43、4．13和9．7倍。HET0016剂量依赖性降低以上血清心肌酶谱水平；②HET0016高、低剂量组心肌梗死面积分别为（6．3±0．16）％和（10．3±0．2）％，与模型对照组（19.8±0．15）％比均有显著性差别；③PD98059可完全阻断HET00l6的作用，但SB20358和SP600125对其没有明显影响。④HET0016增加心肌组织磷酸化ERKl／2蛋白表达，但不影响磷酸化p38 MAPK及JNK蛋白表达。结论：HET0016通过抑制细胞色素P450w-羟化酶对大鼠MI／R损伤有保护作用，其机制与ERK1／2途径有关。