SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长

摘要

目的 研究SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞生长的作用和机制.方法 以人乳腺癌MCF-7细胞为研究目标,Muse细胞分析仪检测SAHA对细胞活力的作用;Real-time PCR和Western blot检测SAHA对CTSV的mRNA及蛋白表达的影响,同时检测利用siRNA干扰技术敲除CTSV后的细胞CTSV表达水平;细胞免疫荧光法检测SAHA对LC3II分子的作用;Real-time PCR和West-ern blot检测SAHA诱导自噬过程中相关ATG分子和LC3的mRNA和蛋白的变化;Bafilomycin A1抑制自噬,随后利用Western blot和Muse细胞分析仪分别检测p62蛋白水平和SAHA作用后的细胞活力.结果 SAHA可以抑制MCF-7细胞的增殖,并促进CTSV的表达.CTSV-siRNA转染细胞后,CTSV的mRNA和蛋白水平均显著性降低.SAHA增加了LC3免疫荧光点的分布,与CTSV-siRNA共同作用可恢复由CTSV-siRNA敲减引起的细胞自噬减弱.SAHA在增强ATG4C和Beclin1表达的同时,LC3B也随之升高而mTOR则下降.抑制CTSV表达后也同时逆转了SAHA的效应.Bafilomycin A1阻断自噬后,被SAHA抑制的p62蛋白的表达和细胞活力显著增强.结论 SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长.