黄芩苷对脂多糖致内皮细胞炎症反应的保护作用及机制研究

摘要

目的 研究黄芩苷对脂多糖(LPS)致人微血管内皮细胞(HMEC)炎症反应的保护作用及作用机制.方法 采用LPS作用HMEC,建立炎症反应模型;以不同浓度的黄芩苷预处理细胞,然后将细胞暴露于LPS,ELISA检测炎症因子ICAM-1、IL-6和MCP-1的含量;荧光观察Ca2+内流并采用流式细胞仪检测细胞内Ca2+水平;免疫荧光法检测NF-κB p65入核情况;双荧光素酶报告基因方法检测NF-κB核内转录活性;Western blot检测NF-κB p65、p-NF-κB p65及TLR4的表达.结果 HMEC暴露于LPS后,出现了明显的Ca2+内流,NF-κB p65发生磷酸化,核内转录活性上调,ICAM-1、IL-6及MCP-1表达上调.不同浓度的黄芩苷均能抑制LPS刺激HMEC后产生的Ca2+内流、NF-κB p65入核及核内转录活性上调,减少ICAM-1、IL-6、MCP-1的表达,下调NF-κB p65、p-NF-κB p65及TLR4的表达,且抑制作用呈现一定的量效关系.结论 黄芩苷能抑制LPS诱导的HMEC炎症反应,其机制与抑制Ca2+内流和NF-κB信号通路的活化,从而降低炎症反应的水平有关.