四嗪二甲酰胺抑制胰腺癌细胞AsPC-1增殖及其机制研究

摘要

目的 观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外对AsPC-1细胞增殖、凋亡及细胞周期阻滞的影响.方法 以不同浓度ZGDHu-1(0、0.025、0.125、0.25、0.5、1.25、2.5、12.5 μmol·L-1)体外作用于AsPC-1细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;瑞氏染色、Hoechst 33258荧光染色观察细胞形态;Annex-in-V/PI双标记分析细胞凋亡率;流式细胞术分析细胞周期变化;Western blot分析凋亡相关蛋白的表达变化.结果 ZGDHu-1对AsPC-1细胞有明显的增殖抑制作用,呈现时间和浓度依赖性;ZGDHu-1能促进细胞凋亡,染色后出现典型的凋亡特征性改变,Annexin V+/PI-表达明显高于对照组(P＜0.05);当ZGDHu-1浓度达到0.25 μmol·L-1时,开始阻滞AsPC-1细胞周期于G2/M期,当浓度达1.25 μmol·L-1时,大部分细胞停留于G2/M期;ZGDHu-1作用AsPC-1细胞48 h后,能明显激活caspase-3酶原;促凋亡蛋白Bax的表达水平较对照组升高.结论 ZGDHu-1在体外能够抑制AsPC-1的增殖,其主要通过激活caspase-3诱导细胞凋亡,同时ZGDHu-1能阻滞AsPC-1细胞周期于G2/M期.