云芝多糖B抑制血管紧张素Ⅱ诱导的巨噬细胞骨调素基因上调表达

摘要

目的 探讨野生云芝多糖水溶性新组分CVPS-B对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的RAW264.7巨噬细胞骨调素(OPN)基因表达的影响及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)及其转录因子ATF-2可能的调控作用.方法 用RT-PCR检测CVPS-B对AngⅡ诱导的RAW264.7巨噬细胞OPN基因表达的影响;用Western blot测定AngⅡ(1 μmol·L-1)诱导RAW264.7细胞p38MAPK转录因子-激活转录因子2(ATF2)表达的时间模式;用Western blot测定CVPS-B对RAW264.7巨噬细胞p38MAPK及其转录因子ATF2磷酸化表达的影响.结果 CVPS-B(10 mg·L-1)在AngⅡ(1 μmol·L-1)刺激前30 min加入培养基抑制作用最明显,共同孵育12 h,抑制率达到50.3%(P<0.01);不同浓度CVPS-B1、10、50 mg·L-1在AngⅡ(1 μmol·L-1)刺激前30 min加入培养基,共同孵育12 h,其抑制率分别为13.8%、41.2%(P<0.01)及63.7%(P<0.01).不同浓度CVPS-B及SB202190预孵12 h,SB202190在5 μmol·L-1(高浓度)时能明显抑制p38MAPK的磷酸化表达,相反,CVPS-B在1O、50 mg·L-1(高与低浓度)时均不能明显抑制p38MAPK的磷酸化表达.CVPS-B能明显抑制ATF2的磷酸化表达并呈剂量依赖性t而且,SB202190加CVPS-B在低剂量时(SB202190 1μmol·L-1加CVPS-B10 mg·L-1)也能明显抑制ATF2的磷酸化表达.结论 CVPS-B能明显抑制AngⅡ诱导的RAW264.7巨噬细胞OPN基因表达.CVPS-B的抑制作用可能是通过调控转录因子ATF-2的活性实现的.