吡格列酮对Aβ25-35引起的皮层神经元损伤保护作用部分机制的研究

摘要

目的 研究吡格列酮对抗淀粉样β蛋白片段25-35(Amyloid-β, Aβ25-35)所致培养皮层神经元损伤作用的机制.方法 取培养7 d大鼠乳鼠大脑皮层神经元,Aβ组加入Aβ25-35(20 μmol·L-1)作用24 h;吡格列酮组和各种阻断剂组,先加入吡格列酮(0.1、1 、10 μmol·L-1)或各种阻断剂作用1 h,然后加入Aβ25-35(20 μmol·L-1)作用24 h;正常对照组加入等量培养基.MTT法测定细胞存活率;免疫荧光染色法测定活性的caspase-3细胞内定位;Western blot检测活性的caspase-3表达水平;Griess法测定培养细胞上清液中一氧化氮(NO)含量.结果 神经元经NSE和NF200免疫荧光鉴定,其阳性率可达90%以上.Aβ25-35(20 μmol·L-1)可使神经元细胞存活率下降、caspase-3表达明显增加,同时神经元培养液中的NO含量也明显增加.吡格列酮可明显抑制Aβ25-35诱导的神经元细胞存活率下降、抑制caspase-3表达的增加,吡格列酮还可明显抑制Aβ25-35诱导的神经元培养液中NO含量增加, 且呈浓度依赖性.GW9662 (10 μmol·L-1)能明显对抗吡格列酮对Aβ25-35诱导的神经元细胞存活率下降、活性的caspase-3表达增加、NO增加的抑制作用.SP600125 (5 μmol·L-1)、SB203580(20 μmol·L-1)和SMT(1 mmol·L-1)可明显对抗Aβ25-35诱导的神经元细胞存活率下降及培养液中NO含量增加.结论 吡格列酮能够明显的抑制Aβ25-35引起的皮层神经元损伤作用,这种作用可能与激活PPARγ受体、抑制JNK信号传导通路和p38MAPK信号传导通路有关.