侧柏总黄酮的分离纯化及对5-脂氧合酶的抑制作用

摘要

目的 从侧柏叶中分离纯化活性成分总黄酮并探讨其对5-脂氧合酶的抑制作用.方法 石油醚加热回流除去大部分叶绿素等脂溶性杂质,再用体积分数为50%乙醇加热回流提取;提取液浓缩去除乙醇后用乙酸乙酯提取,减压浓缩得粗黄酮;粗黄酮过聚酰胺色谱柱,用体积分数为70%的甲醇洗脱,浓缩得总黄酮;高效液相色谱法测定大鼠中性白细胞5-脂氧合酶的产物5-羟廿碳四烯酸,Fura-2/AM荧光技术测定细胞内游离钙浓度.结果 用芦丁作参照品,测得分离的产物总黄酮含量为93%,总黄酮对5-脂氧合酶抑制的IC50为22.2;25～125 mg·L-1的总黄酮对fMLP诱导的细胞内游离Ca2+水平增高抑制率为15.2%～35.9%.结论 该方法较简单,分离的总黄酮纯度高,是一种可行的总黄酮提取方法;侧柏总黄酮对5-脂氧合酶的活性有较强的抑制作用,抑制细胞内游离Ca2+水平增高可能是抑制5-脂氧合酶的作用机制之一.