支气管肺发育不良新生大鼠核转运蛋白KPNA2表达及其作用的研究

摘要

目的:研究新生大鼠支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia，BPD)发生、发展中核转运蛋白KPNA2定位及表达的动态变化，探究其在早产儿BPD发病机制中的作用。方法:采用85%的吸入氧浓度诱导新生SD大鼠BPD模型( n＝50)，对照组吸入空气( n＝50)，两组分别于1、3、7、10、14 d采集肺组织标本，分离、纯化及培养肺泡Ⅱ型上皮细胞。利用免疫组化、免疫荧光、Western blot及实时荧光定量PCR检测KPNA2的分布及表达。 结果:免疫组化可见KPNA2主要定位于肺泡上皮细胞的胞浆及胞核内，与对照组相比，BPD组1 d胞核、胞浆均表达增加，3～14 d胞核表达明显减弱，胞浆表达增强。细胞免疫荧光可见KPNA2在对照组1～14 d主要定位于细胞核，BPD组3～14 d主要定位于细胞浆，BPD组KPNA2核表达较对照组减弱，胞浆表达较对照组增强。KPNA2总蛋白及浆蛋白表达趋势基本一致，与对照组比较，BPD组1 d开始升高( P<0.05)，3 d达高峰( P<0.05)，7 d开始逐渐下降( P<0.01)，14 d仍高于对照组( P<0.05)；BPD组KPNA2核蛋白表达3 d开始降低( P<0.01)，持续降低至14 d( P<0.05)。与对照组相比，BPD组KPNA2 mRNA表达1 d开始升高( P<0.05)，3 d达高峰( P<0.05)，7 d开始逐渐下降( P<0.01)，至14 d仍高于对照组( P<0.05)。 结论:暴露于高氧中新生鼠KPNA2核转运功能障碍，可能是影响BPD肺泡上皮细胞DNA损伤应答早期启动的重要机制。