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基于 LC Chip Q-TOF MS/MS 的非标记比较策略研究丙二酰黄芪皂苷 I 抗白血病 U937 细胞的差异蛋白质组

     

摘要

目的:研究丙二酰黄芪皂苷 I 抗白血病 U937 细胞增殖的差异表达蛋白质组。方法:基于 LC Chip Q-TOF 系统建立和优化了一种非标记蛋白质组比较方法-多肽色谱峰面积。方法学研究表明,该方法操作简单、方便,具有较高的重复性和宽动力学范围。然后,将建立的优化方法组合归一化计算应用于新化合物丙二酰黄芪皂苷 I 抗白血病 U937 细胞增殖的差异蛋白质组表达研究。结果:分析结果表明,2 倍以上表达差异的蛋白质 15 个,其中 6 个蛋白质的表达差异获得了 Western blotting 确证。此外,通过差异蛋白质的相互作用分析,PARP1、Caspase-3 和-9 的 Western blot 检测及 Caspase 抑制剂实验,我们发现 Caspase激活在丙二酰黄芪皂苷 I 抗白血病 U937 细胞增殖效应中起重要作用。结论:通过该优化的非标记蛋白质组比较方法,找到了一些与丙二酰黄芪皂苷 I 抗白血病 U937 细胞增殖密切相关的功能蛋白质,为深入开展其分子机理研究奠定了基础。

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