纯化标签不同融合端的选择对蝎毒肽色谱行为的影响

摘要

10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.06.006%　　目的考察组氨酸标签置于抗癫痫肽 AEP 肽链不同末端对重组肽亲合层析的影响.方法同源建模构建 AEP 三维结构,预测空间构象对纯化标签的屏蔽效应；构建组氨酸标签不同末端融合表达载体；对比两者相同色谱条件下的层析行为及生物活性.结果 AEP 构象分析显示,肽链 C 末端空间屏蔽效应小；在两者表达量相当的前提下,经亲和层析纯化,每升发酵液可获色谱纯样品,AEP-His6为3.3 mg,Met-Gly-His6-AEP为0.8 mg；His tag C 端融合对 rAEP 活性影响较 N 端融合小.结论对于蝎毒这类空间结构简单的小分子活性肽,组氨酸标签融合端的选择对重组肽色谱行为及活性有显著影响.