建立双重荧光定量PCR方法检测蜱传疏螺旋体

摘要

目的 建立双重荧光定量PCR方法,同时检测Borrelia burgdorferi和Borrelia miyamotoi.方法 分别利用recA基因、glpQ基因合成引物探针,并优化反应条件.在单重实验的基础上建立双重荧光定量PCR方法,对该方法灵敏度和特异度进行检测,并探索其他因素对反应结果的影响.使用模拟样本和实际样本评价新方法的检测效用.结果 双重荧光定量PCR方法具有良好的灵敏度和特异度,与单重实验方法比较,检测Ct值无明显差异(P＞0.05),病原浓度与检测Ct值具有良好的线性相关关系.两种病原浓度差异和其他病原的存在对检测结果无明显影响.使用该方法检测模拟蜱样本和实际蜱样本具有良好的实用性.结论 本实验建立的多重荧光定量PCR方法能快速便捷的检测两种疏螺旋体,为蜱样本病原鉴定提供了有价值的检测工具.