结核分枝杆菌FurB基因真核表达质粒的构建及表达

摘要

目的构建结核分枝杆菌铁调控基因furB真核表达载体.方法以BamHⅠ和HindIII双酶切pQE-80L-furB获得furB基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),重组质粒酶切鉴定后以阳离子聚合物转染COS-7细胞, 分别以RT-PCR方法检测mRNA表达和间接免疫荧光技术检测目的蛋白的表达.结果构建了重组质粒pcDNA3.1(-)-furB,RT-PCR结果证明furB可在COS-7细胞中转录,用间接免疫荧光检测,显示COS-7细胞内有FurB蛋白的表达.结论成功构建了结核分枝杆菌furB基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-furB, furB基因可以在COS-7细胞中表达.