弓形虫抗原与霍乱毒素A2/B亚基复合基因在小鼠体内诱导的免疫反应

摘要

目的观察弓形虫主要表面抗原SAG1、SAG2与霍乱毒素A2/B亚基复合基因真核质粒经肌肉免疫小鼠所诱导的免疫反应.方法将SAG1基因、SAG2基因及CTXA2/B基因定向连接插入真核表达质粒pcDNA3.1,经酶切及测序,获得pcDNA3.1-SAG1-SAG2及pcDNA3.1-SAG1-SAG2-CTXA2/B 的重组子;碱裂解法大量制备经肌肉注射免疫BALB/c鼠,每只鼠经后腿肌肉注射质粒100μg,每2周免疫1次,共3次,以PcDNA3.1空质粒注射组及PBS组为对照,分别于每次免疫前断尾取血和免疫后4周取小鼠脾脏测定T淋巴细胞增殖活性及NK细胞活性, ELISA法测定IgG抗体.结果免疫组小鼠的IgG抗体水平明显提高,NK细胞杀伤活性和T细胞增殖活性也明显增强.免疫鼠抗攻击感染的时间延长.结论含有霍乱毒素的复合基因免疫小鼠后体液免疫和细胞免疫水平均有提高.