细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗构建及鉴定

摘要

目的 构建细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗并鉴定.方法从包囊中分离原头节,超声粉碎后抽提总RNA为模板,采用RT-PCR方法 扩增Eg95编码基因并鉴定.将该基因片段定向克隆到大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pBCG中构建pBCG-Eg95重组质粒.用电穿孔法将重组质粒导入BCG菌构建rBCG-Eg95疫苗,用HgCl2筛选经PCR鉴定.结果 经电泳及测序证实从原头节扩增出471bp Eg95蛋白编码基因.重组质粒pBCG-Eg95经酶切及PCR证实,并经PCR鉴定已成功转入BCG.结论 成功构建细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗,为rBCG-Eg95疫苗进一步研究奠定基础.