猪链球菌2型四川株溶血素主要抗原决定簇基因的克隆及表达

摘要

目的 研究有效的猪链球菌病疫苗.方法 采用PCR方法,以四川株、参考菌株和江苏分离株猪链球菌2型基因组DNA为模板扩增溶血素基因,克隆至PMD18-T载体.提取阳性质粒,进行PCR和酶切鉴定.经测序正确后,构建原核表达载体pET32a-SLY,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG进行诱导.结果 重组菌菌体裂解物经 SDS-PAGE 电泳可检测到相对分子量约为43ku的重组蛋白,表达产物经纯化后,免疫印迹法(Western-blotting)分析证实,该重组蛋白与SS2-6阳性血清发生特异性反应.结论 本实验旨在通过对溶血素主要抗原决定簇基因的克隆表达,分析表达产物的抗原性和免疫原性,为进一步对猪链球菌2型疫苗共表达的研制奠定基础.