超声联合微泡对A549肺癌细胞卡铂化疗微环境中Ca2＋稳态的影响

摘要

目的 探讨超声联合微泡对A549细胞卡铂化疗微环境中Ca2＋稳态的影响及其协同卡铂抑制细胞活性的可能机制。方法 按照是否使用造影剂,以及卡铂的不同剂量分为超声辐照（US）组（A组）、超声联合微泡（USMB）组（B组）、低剂量卡铂（100 μg/ml）＋ US组（C组）、低剂量卡铂＋USMB组（D组）、高剂量卡铂（200 μg/ml）＋US组（E组）、高剂量卡铂＋USMB组（F组）,经无Ca2＋缓冲液漂洗、负载钙离子荧光探针fluo-4 AM、再漂洗,激光共聚焦显微镜实时测定基态、加药中、加药后、超声辐照（0.4 W/cm2,10 s）后每组活细胞内Ca2＋荧光强度,总结组内、组间钙超载现象,并进行比较分析。结果 超声辐照后,细胞内Ca2＋标准化荧光强度升高,达到极值,后回落至新稳态（A、B、E、F组勾选细胞）或产生二次钙振荡（C、D组部分细胞）。B组勾选细胞钙振荡均有叠加,C、D两组部分细胞有叠加,A组有4个细胞延迟发生钙振荡。D组钙超载时间最长。与A组比较,其余五组钙振荡幅度增加且差异有统计学意义（均P＆0.05）。与A组比较,B、D组钙超载总时长增加且差异有统计学意义（均P＆0.05）。结论 在无Ca2＋细胞外液中,US、USMB、卡铂＋US、卡铂＋USMB均为A549细胞钙超载的直接刺激。SonoVue、卡铂、卡铂＋SonoVue为超声辐照诱导A549细胞钙超载的增效刺激。US、USMB与卡铂可协同诱导A549细胞内源性钙释放,钙超载为超声联合微泡对卡铂化疗可能的增效机制。