正交优化芒果SRAP扩增体系及引物筛选

摘要

利用正交实验设计,对芒果SRAP-PCR反应的5因素(Mg2+、dNTPs、模板DNA、引物和Taq DNA聚合酶)4水平的扩增效果进行研究,确立适合芒果SRAP-PCR反应的最佳体系.总体积25 μL的SRAP-PCR优化的最佳反应体系中含有:2.5 μL 10xbuffer、20 ng模板DNA、2.5 mmol/L Mg2+、0.2 mmol/L dNTPs、0.4 μmo1/LPrimer、TaqDNA聚合酶1.5 U.并运用该体系从153对引物组合中初步筛选出50对SRAP引物组合.建立的SRAP标记可为芒果遗传多样性、分子标记及辅助育种等提供研究基础.