海南龙血树类黄酮3'-羟化酶基因(DcF3'H)的克隆与表达分析

摘要

类黄酮3'-羟化酶(Flavonoid 3'-hydroxylase,F3'H)是植物黄酮类化合物骨架修饰途径中的关键酶之一,在形成结构多样化的黄酮类化合物中起重要作用.在前期已获得的龙血树转录组数据基础上克隆了1个海南龙血树F3'H基因,命名为DcF3'H.DcF3'H含有的开放阅读框长1533bp,编码510个氨基酸.推导的DcF3'H分子量为58ku,等电点pI为6.59.DcF3'H含有细胞色素P450的保守结构域和CYP基序,与甘蔗、玉米、猕猴桃、小麦、烟草、黄瓜和大豆等植物的F3'H同源性分别为76％、75％、77％、74％、75％、76％和75％.进化树分析表明,DcF3'H与中国水仙亲缘关系较近,与苜蓿和鹰嘴豆的亲缘关系较远.荧光定量表达结果显示:DcF3'H在根、茎、叶、花和果等组织中均有表达,其中在花中表达量最高,根中表达量最低;无机盐诱导剂处理能显著提高DcF3'H的表达量,处理3d时DcF3'H的表达量提高了5.58倍.此结果将为进一步研究海南龙血树类黄酮3'-羟化酶基因的功能奠定基础.