假臭草DNA提取及RAPD反应体系的优化

摘要

以假臭草叶片为材料,对影响其随机扩增多态DNA(RAPD)反应的各因素进行优化,建立了假臭草RAPD的优化反应体系和程序,即在10μL反应体系中,5ng(/10μL)模板DNA,1.0 μmol/L随机引物F15,150μmol/LdNTPs,2.0mol/LMg2+,1.0UTaq DNA聚合酶;扩增程序为95℃预变性4min,95℃变性40 S,36℃退火40 s,72℃延伸1 min,10个循环,后94℃变性30 s,35℃退火30 s,72℃延伸1 min,35个循环,72℃延伸5 min,4℃保温.