小鼠视神经损伤对视网膜神经节细胞存活率的影响

摘要

目的探讨小鼠视神经钳夹损伤（ONC）后视网膜神经节细胞（RGCs）存活率变化。方法选取97只6～8周龄雄性C57BL/6J小鼠, 按照随机数字表法分为正常组（5只）、假手术组（5只）、ONC组（87只）。正常组双眼不进行任何操作;假手术组左眼不进行任何操作, 右眼行假手术操作;ONC组左眼行ONC, 右眼行假手术对照。正常组分别计算左右眼RGCs密度, 比较其差异;假手术组计算假手术眼RGCs密度, 比较其与正常组平均RGCs密度的差异;ONC组中, 以左眼（ONC眼）与右眼（假手术眼）RGCs密度的比值计算RGCs存活率, 然后比较不同钳夹持续时间（5, 10, 20, 30 s）的RGCs存活率差异（取材时间统一为钳夹后7 d）, 以及不同取材时间（3, 4, 5, 7, 14, 30, 60, 90, 180 d）的RGCs存活率差异（钳夹持续时间统一为20 s）。结果正常组左右眼RGCs密度分别为（5 167.3±55.6）个/mm2和（5 199.6±44.8）个/mm2, 差异无统计学意义（P＆0.05）。正常组与假手术组RGCs密度分别为（5 183.5±33.4）个/mm2和（5 151.5±87.6）个/mm2, 差异无统计学意义（P＆0.05）。ONC组不同钳夹时间（5, 10, 20, 30 s）的RGCs存活率分别为（37.6±1.1）%、（34.0±0.9）%、（33.6±1.6）%、（30.3±0.6）%（P＆0.01）。钳夹5 s与 30 s相比, ONC组小鼠RGCs存活率差异有统计学意义（P＆0.01）;其余不同钳夹时间相比, ONC组小鼠RGCs存活率差异均无统计学意义（P＆0.05）。ONC组不同取材时间（3, 4, 5, 7, 14, 30, 60, 90, 180 d）的RGCs存活率分别为（85.4±2.0）%、（67.6±3.1）%、（43.0±1.0）%、（33.6±1.6）%、（22.7±2.0）%、（12.8±0.6）%、（10.4±0.8）%、（8.6±0.5）%、（6.7±0.2）%（P＆0.01）, 尤其3～5 d, RGCs存活率大幅下降, 30 d后RGCs存活率呈平稳下降趋势。结论在ONC小鼠模型中, 不同钳夹持续时间对RGCs造成的损伤程度不同, 且ONC后RGCs死亡呈进行性发展, 提示在原发性损伤（钳夹）后, 小鼠的RGCs经历了继发性损伤。因此, 有效控制RGCs的继发性损伤, 可能成为治疗视神经损伤性疾病的关键。