高效去除异体组织中脱细胞试剂十二烷基硫酸钠残留的清洗方法

摘要

背景:十二烷基硫酸钠是一种常用于同种异体组织脱细胞处理的脱细胞试剂,然而其难以从组织内去除,少量残留即可产生细胞毒性。目的:提出一种高效去除异体组织中脱细胞试剂十二烷基硫酸钠的清洗方法。方法:选择纯水、钾盐溶液和乙醇作为清洗介质,并通过不同介质的排列组合进行清洗,对十二烷基硫酸钠残留量、异体真皮和异体肌腱的组成、结构、力学性能和细胞毒性等方面进行检测,评价清洗效果。结果与结论:总体上,乙醇+氯化钾、体积分数75%乙醇+氯化钾对样品的成分和结构无大影响。首先,十二烷基硫酸钠浸泡处理将异体真皮和异体肌腱的DNA残留控制在50 ng/mg以下之后再进行清洗,异体真皮、异体肌腱中的十二烷基硫酸钠含量分别降低了96.7%和97%;其次,异体真皮、异体肌腱的糖胺聚糖和胶原蛋白含量均无较大变化;此外,异体肌腱在清洗后,其最大拉力、强度和模量高于脱细胞后,与原材料相比无显著性差异;最后,细胞毒性结果显示异体真皮和异体肌腱清洗后的细胞存活率高于80%,细胞毒性分级不大于1级。