长链非编码RNA-H19对缺血缺氧条件下骨髓间充质干细胞生存和血管再生能力的影响

摘要

背景：课题组前期研究发现骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）移植后其在局部梗死组织中的生存力低下,形成新生血管的密度较低,在一定程度上影响了其治疗的效率.长链非编码RNA-H19（lncRNA-H19）被证实与骨髓间充质干细胞分化及血管形成密切相关.目的：体外观察 lncRNA-H19对骨髓间充质干细胞在缺血缺氧条件下生存和血管再生能力的影响,并探讨其可能机制.方法：体外培养的骨髓间充质干细胞分为5组：MSCs＋H19组、MSCs＋H19对照组（MSCs＋H19 NC组）, MSCs＋si-H19组、MSCs＋si-H19对照组（MSCs＋si-H19 NC组）和MSCs组.其中MSCs＋H19组和MSCs＋H19 NC组分别予以转染lncRNA-H19及lncRNA-H19 scramble RNA阴性对照,MSCs＋si-H19组和MSCs＋si-H19 NC组分别转染lncRNA-H19 siRNA及lncRNA-H19 siRNA scramble阴性对照,体外缺血缺氧条件（无血清,体积分数为1% O2）下培养24 h,MTS法检测细胞增殖情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况.取细胞培养基上清液分别刺激人脐静脉内皮细胞,观察血管形成情况.Western blot检测各组血管内皮生长因子A表达.结果与结论：①与MSCs组及MSCs＋H19 NC组相比,MSCs＋H19组增殖能力显著增强,凋亡显著减少,血管管腔样结构明显增多（P 〈 0.01）;②与MSCs组及MSCs＋si-H19 NC组相比,MSCs＋si-H19组增殖能力显著减弱,凋亡显著增加,血管管腔样结构明显减少（P 〈 0.01）;③与MSCs组及MSCs＋H19 NC组相比, MSCs＋H19组血管内皮生长因子A表达显著增高;④与MSCs组及MSCs＋si-H19 NC组相比,MSCs＋si-H19组血管内皮生长因子 A 表达显著减少;⑤结果表明,lncRNA-H19促进骨髓间充质干细胞在体外缺血缺氧环境下的生存并增强其血管形成能力,此作用可能与其上调血管内皮生长因子A表达相关.